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400-021-2021
產品介紹
人肝癌細胞HEPG2/STR鑒定介紹
該細胞系來自15歲男性白人的組織。形態為上皮形，模式染色體數為55，在免疫抑制小鼠中不致瘤。
人肝癌細胞HEPG2/STR鑒定特性
1、來源：肝細胞癌
2、形態：上皮細胞樣，貼壁生長
3、含量：>1x106個/mL
4、污染：支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性
5、規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
運輸和保存
可選擇干冰運輸及發送復蘇存活細胞方式：
?。?）干冰運輸，收到后立即轉入液氮或者-80度冰箱凍存或直接復蘇；
?。?）存活細胞，收到后應繼續生長，傳代達到細胞生長狀態良好時，再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。
?。?）收到細胞后請拍照，3天內如果發現污染，請及時拍照與我們聯系。
細胞用途：僅供科研使用。
HepG2人肝癌細胞/STR鑒定/賽百慷（iCell）接受后的處理：
?。?）收到細胞后，請檢查是否漏液，如果漏液，請拍照片發給我們。
?。?）請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態，去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
?。?）棄去T25瓶中的培養基，添加6ml新的*培養基。
?。?）如果細胞長滿（90%以上）請及時進行細胞傳代。
?。?）接到細胞次日，請檢查細胞是否污染，若發現污染或疑似污染，請及時與我們取得聯系。
細胞培養步驟
一、培養基及培養凍存條件準備：
1、準備MEM培養基；北美胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2、培養條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1、棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2、加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3、按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。
4、收到細胞后*傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，后續傳代根據實際情況按1:2到1:5的比例進行。
細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。
下面T25瓶為例；
1、細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml*培養基終止消化，可使用血球計數板計數。
2、1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3、將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
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